РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ

Реакция нейтрализации базирована на возможности специфичных вируснейтрализующих антител перекрыть заразные, гемагглютинирующие, гемадсорбирующие, цитопатические, бляшкообразующие и др. характеристики вирусов. Она применяется в 2-ух направлениях:

1) для идентификации вирусов;

2)для серодиагностики вирусных зараз, т.е. для определения нарастания титра вируснейтрализующих антител в «парных» сыворотках.

Составляющие:

1.Исследуемый вирус (при идентификации выделенного вируса) либо исследуемая сыворотка (при РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ серодиагностике инфекции).

2.Диагностическая (группо-, видо-, типоспецифическая) сыворотка (при идентификации вируса) либо узнаваемый вирус – диагностикум (при серодиагностике).

3.Индикаторный объект: животные, куриные зародыши, культуры тканей либо эритроциты.

Реакции нейтрализации in vivo ставят в культурах клеток (см. прилож. 3, рис.15), куриных зародышах и на лабораторных животных.

Принцип. Консистенцией вирус (исследуемый либо узнаваемый) + сыворотка (диагностическая РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ либо исследуемая), выдержанной в течение определенного времени, заражают культуру клеток, куриный зародыш либо лабораторное животное. При (+) реакции, т.е. при нейтрализации вируса антителами индикаторные объекты продолжают нормально существовать, а в контроле – смерть либо соответствующие конфигурации.

Реакция нейтрализации in vitroреакция торможения гемагглютинации (РТГА).

РТГА применяется:

- для серотипирования вирусов;

- для серодиагностики зараз РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ.

Выделяют два метода постановки:

- капельный метод на стекле (приблизительная реакция), применяется для серотипирования вирусов;

- развернутый в пробирках.

Механизм. У неких вирусов (к примеру, гриппа) есть гемагглютинин, вызывающий агглютинацию эритроцитов разных животных зависимо от вида вируса: При наличии в сыворотке антител – антигемагглютининов наблюдается ингибированные активности вирусов (см. прилож. 3, рис РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ.16).

РТГА. Цель: серотипирование вируса гриппа А.

Составляющие.

1.Исследуемый материал – аллантоисная жидкость куриного зародыша.

2.Диагностические противогриппозные типоспецифические сыворотки.

3.5% взвесь куриных эритроцитов.

4.Физиологический раствор.

Реакция ставится на стекле капельным методом. На стекло наносят по 1 капле исследовательских сывороток и исследуемого материала, перемешивают, потом добавляют 1 каплю взвеси эритроцитов. При положительной реакции наблюдается РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ гомогенное покраснение, а при отрицательной – выпадение хлопьев красноватого цвета (гемагглютинация).

ОПСОНО – ФАГОЦИТАРНАЯ РЕАКЦИЯ

Применяется для определения опсонинов – антител, стимулирующих фогоцитарную активность лейкоцитов, т.е. серодиагностики зараз, к примеру, бруцеллёза.

Усиление фагоцитоза происходит за счёт присоединения опсонинов с активными центрами (Fав – кусок) к детерминантам микробов, а потом при помощи Fc – фрагментов к Fc РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ – рецепторам фагоцитов. В обычной сыворотке содержится маленькое количество опсонинов, которые проявляют свое действие в присутствии комплемента. В иммунной сыворотке опсонинов больше и их активность в наименьшей степени находится в зависимости от комплемента.

Составляющие опыт Контрль
1. Исследуемая сыворотка 2. Обычная сыворотка 3. Дневная микробная культура (напр., стафилококковая) 4. Фагоциты – взвесь РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ нейтрофилов + - + + - + + +

Инкубация при 370С в течение 30 минут. Из каждой пробирки готовят мазки, окрашивают по Романовскому – Гимзе и считают под микроскопом количество бактерий в 100 и поболее нейтрофилах, т.е. определяют фагоцитарный показатель.

Фагоцитарный показатель – количество бактерий, поглощенных одним нейтрофилом.

Опсонический индекс – фагоцитарный показатель иммунной (исследуемой) сыворотки / фагоцитарный показатель обычной сыворотки.

Чем РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ выше опсонический индекс (должен быть > 1), тем выше иммунитет.

Опсоно-фагоцитарный индекс – это цифровой показатель = количество фагоцитов х оценка фагоцитоза (зависимо от количества поглащенных бактерий). Наибольший показатель – 75.

ИММУННЫЙ СТАТУС

Иммунный статус определяется совокупой характеристик специфичных и неспецифических причин защиты и охарактеризовывает персональную иммунореактивность организма. Оценка иммунного статуса имеет значение:

-для РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ выявления иммунологической дефицитности (иммунодефицита) и других патологических нарушений работы иммунной системы;

-наблюдения за эффективностью иммунодепрессивной либо иммуностимулирующей терапии;

-определения показаний и выбора терапевтических препаратов.

Исследование иммунного статуса включает проведение тестов 1-го и 2-го уровней.

Испытания 1-го уровня (ориентирующие):

1.определение причин естественной резистентности (БАС, лизоцим, комплемент и др.);

2.подсчет абсолютного и относительного РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ ВИРУСОВ числа лимфоцитов в периферической крови;

3.подсчет числа Т- и В- лимфоцитов;

4.оценка фагоцитарной активности лейкоцитов;

5.определение концентрации различных классов иммуноглобулинов.

Испытания 2-го уровня (аналитические):

1.определение субпопуляции Т- лимфоцитов;

2.определение многофункциональной активности Т- и В- лимфоцитов;

3.определение медиаторов иммунной системы;

4.Испытания на ГЧЗТ.


reakciya-na-bolezn-u-detej-starshe-goda.html
reakciya-na-povedenie-materi.html
reakciya-nejtralizacii-virusov.html